產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
游離細(xì)胞DNA純化試劑盒
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貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
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AC101 |
BcMag? 游離細(xì)胞DNA純化試劑盒 |
50preps |
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AC102 |
BcMag? 游離細(xì)胞DNA純化試劑盒 |
100preps |
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組件 |
存儲(chǔ)條件 |
目錄號(hào)：AC101 |
目錄號(hào)：AC102 |
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BcMag? HO-DNA Beads |
4°C |
1.0 ml |
2 ml |
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10x Lysis Buffer |
4°C |
5 ml |
10 ml |
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1x Elution Buffer |
4°C |
0.5ml |
1.0 ml |
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Proteinase K (20mg/ml) |
-20°C |
10 mg |
20 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
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SDS (20%) |
Room temperature |
2.5 ml |
5 ml |
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DTT (20%) |
-20°C |
2.5 ml |
5 ml |
運(yùn)輸條件：在室溫環(huán)境下運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：根據(jù)上表要求，在收到試劑盒后，儲(chǔ)存不同試劑。
簡(jiǎn)介
游離細(xì)胞DNA (cfDNA)是指來(lái)自細(xì)胞凋亡或壞死后，在血液或者其他體液中存在的，游離于細(xì)胞外的雙鏈DNA片段，包括循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）、游離線粒體DNA（ccf-mtDNA）和游離胎兒細(xì)胞DNA（cffDNA）。這種DNA從各種細(xì)胞來(lái)源釋放到血液中，例如癌細(xì)胞，死細(xì)胞和胎兒細(xì)胞。cfDNA的提取對(duì)于各種應(yīng)用非常重要，例如無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)，癌癥診斷和疾病監(jiān)測(cè)。目前，存在多種游離細(xì)胞DNA純化方法，和基于這些方法和方案變化的許多試劑盒。這些不同的程序和改變導(dǎo)致了一系列不同的游離細(xì)胞DNA純化方式，方法不同可能會(huì)影響游離細(xì)胞DNA的產(chǎn)量和純度。由于無(wú)細(xì)胞樣品中存在微量的循環(huán)核酸，以及其他污染物（如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNA）的存在，從血漿、血清和尿液中大規(guī)模分離循環(huán)核酸回收cfDNA具有很大難度。游離細(xì)胞DNA純化試劑盒提供了一種從其他污染物中純化cfDNA的可靠而有效的方法。
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cfDNA的提取對(duì)于生命科學(xué)，醫(yī)療保健和法醫(yī)學(xué)的許多應(yīng)用至關(guān)重要。在產(chǎn)前檢測(cè)中，從母親血液中提取的cfDNA可用于確定胎兒的基因組成，這有助于檢測(cè)任何遺傳疾病或染色體異常。在癌癥診斷中，血液中cfDNA的存在可用于監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)展，并評(píng)估治療的有效性。在法醫(yī)學(xué)中，cfDNA的提取用于從犯罪現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)的血液樣本中識(shí)別個(gè)體。
BcMag ? 游離細(xì)胞DNA純化試劑盒旨在高效、有序地從人血漿中提取cfDNA。該試劑盒使用我們獨(dú)特的專(zhuān)有磁珠和優(yōu)化的緩沖液體系。本試劑盒可以使用游離細(xì)胞DNA BCT收集管從100μL至10 ml（通常產(chǎn)生約25納克cfDNA）的人血漿中高效分離出循環(huán)游離細(xì)胞DNA（cfDNA）。該程序采用溫和的裂解條件，避免了嚴(yán)苛裂解條件對(duì)核酸的破壞，如堿性裂解和有毒化學(xué)物質(zhì)裂解細(xì)胞；保證了DNA的完整性和避免了殘留在樣品中有機(jī)溶劑耗時(shí)的清除過(guò)程。純化的cfDNA具有極高的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR，ddPCR，NGS分析等。當(dāng)與自動(dòng)化操作設(shè)備結(jié)合使用時(shí)，可以同時(shí)分離多個(gè)樣品?；蛘?，可以使用磁力架手動(dòng)處理樣品。
與傳統(tǒng)的分離cfDNA的方法相比，磁珠法具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)。磁珠比玻璃纖維過(guò)濾器可以更有效地結(jié)合DNA，從而產(chǎn)生更高、更一致的產(chǎn)量。此外，由于沒(méi)有使用過(guò)濾器或真空歧管，因此在提取過(guò)程中不會(huì)產(chǎn)生堵塞細(xì)胞顆粒的情況。這種堵塞問(wèn)題在富含蛋白質(zhì)的大體積樣品（如血漿）中尤其常見(jiàn)，而這些樣品通常被用于cfDNA研究。
cfDNA純化試劑盒的工作流程
游離細(xì)胞DNA純化試劑盒使用磁珠和特異性結(jié)合劑的組合從其他污染物中純化cfDNA。該試劑盒的工作原理是將cfDNA與磁珠結(jié)合，并將其與蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和RNA等其他污染物分離。然后，純化的cfDNA可用于下游應(yīng)用，例如PCR，測(cè)序和基因分型。
1. 向樣品中加入裂解緩沖液和蛋白酶K以裂解樣本并在65°C下孵育。
2. 添加功能性磁珠，并將磁珠和樣品溶液，通過(guò)渦旋/吹吸方式混勻，結(jié)合DNA。
3. 清洗磁珠。
4. 使用磁力架將磁珠與樣本溶液分離。
5. 從磁珠上洗脫DNA。
特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
? 可靠有效的純化：游離細(xì)胞DNA純化試劑盒提供了一種可靠有效的純化cfDNA的方法，這對(duì)于下游應(yīng)用的準(zhǔn)確結(jié)果非常重要。
? 高產(chǎn)率：該試劑盒可提供高產(chǎn)量的cfDNA提取方式，這對(duì)于需要大量DNA的應(yīng)用（例如測(cè)序和基因分型）至關(guān)重要。
? 可根據(jù)需要擴(kuò)大或者縮小實(shí)驗(yàn)提取體積。
? 易于使用：該試劑盒易于使用，可以在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行，不需要高深的技術(shù)專(zhuān)業(yè)知識(shí)。
? 多功能：該試劑盒可用于各種體液，包括血液，血漿和其他體液，適用于各種應(yīng)用。
? 靈活的設(shè)計(jì)，可以手動(dòng)或全自動(dòng)設(shè)備分離cfDNA
? 全自動(dòng)化操作，無(wú)需苯酚萃取
? 提取體積范圍為100μL到10ml的血漿
? 洗脫溶液體積范圍為15μL到50ml
